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皮肤光老化在外观上表现为皮肤粗糙、松弛、下垂,出现皱纹、不规则色斑和毛细血管扩张。光老化的严重程度取决于个体对日光的耐受性和对日光损伤的修复能力,光老化在曾接受过度日光照射的浅肤色人群中更为显著,在人体面部、颈部及上肢的伸展侧部位最为显著。
日光是由多种波段的光线组成,其中对皮肤影响最大的是波长290nm-400nm的紫外线。UVB波长为290-320nm,主要作用于皮肤表皮层,引起皮肤的急性损伤,如红斑、水肿等;UVA波长为320-400nm,主要作用于皮肤真皮层,直接影响胶原蛋白、弹性纤维、糖胺聚糖结构,同时可直接影响成纤维细胞活性,促进基质金属蛋白酶释放,使结缔组织瓦解,出现皱纹。紫外线照射可产生活性氧,使长期光照部位皮肤受到氧化损伤,氧化损伤可引起线粒体和核DNA损伤。自由基清除剂是防护皮肤光老化的有效方法之一。[2]
对光老化的防护应该从早年开始,可通过避光、外用遮光剂和抗氧化剂以及维甲酸等进行防护。防晒霜可以防止或减轻紫外线对皮肤的损伤,或防止受损皮肤进一步损伤,有利于损伤的修复,防晒霜SPF值指数越高,对UVB的防护作用越好。但往往UVA对皮肤的损伤作用也难以忽略,市面上宣称具有PA值的一些产品,可以对选购防晒产品有一定的参考价值。防晒霜因为涂抹均匀性、防护能力随照射时间改变等原因,往往不能完全防护紫外对皮肤的伤害。[3]
为了开发出一款能够有效针对光老化的活性物,减少紫外对皮肤的直接、间接损伤作用,EXSYMOL开发了ALISTIN (INCI名称脱羧肌肽HCl),并通过不同角度验证了该产品在抗光老化方面的作用,在本文中将展开以下内容:
1)考察UVB存在下,ALISTIN对细胞DNA的防护作用,及UVB引起的人体重建表皮(HRE)体内氧化还原平衡失调的快速恢复;
2)体外全皮肤模型,考察研究了急性UVA暴露引起的分子反应,并选定的生物标志物(COL1A1, DCN,ELN, FBN1, IL-1α、MMP1)动力学,及含有ALISTIN的SPF值10到50的O / W乳液(包括专门紫外线A + B防护剂)使用效果评估,比较纯抗氧化剂和紫外线防护效果。
ALISTIN分子式
1.对UVB的防护作用
1.1 Alistin对DNA的保护作用
实验模型,彗星实验,考察细胞DNA受损程度,DNA受损程度越严重,彗星拖尾现象越严重,如未受损,则保持球形。D1/d2是最长轴与最短轴之比,圆形趋近1,比例越大,变形越大,+/-DS是两轴之差值,趋于0最好。
UVB辐照下,细胞DNA结构破坏,拖尾严重;添加Alistin组,DNA的形态基本维持球形,与对照组相同,可预防对细胞DNA的损伤。
1.2 Alistin防止细胞损伤
实验模型,选择强度为0.5J/cm的UVB照射人体重建表皮,观察皮肤结构的变化及细胞的状态。
未经Alistin处理过的皮肤,经UVB辐照后,基底层出现大量晒伤甚至死亡细胞;预先涂抹Alistin组,基底层组织结构完好,未出现细胞损伤或死亡情况。
1.3 Alistin快速恢复皮肤氧化还原状态
实验模型,选择强度为0.5J/cm的UVB照射人体重建表皮,考察皮肤内的还原型谷胱甘肽和氧化型谷胱甘肽的比值(GSH/GSSG)变化,以及细胞形态变化。
人体重建表皮(HRE)
谷胱甘肽作为体内重要的抗氧化剂,对皮肤的稳态调节具有重要意义。还原型谷胱甘肽在氧化应激压力下会变成氧化型谷胱甘肽,GSH/GSSG比值的变化可以看出皮肤内的氧化压力状态,比值大于1,自我修复能力强,比值越小,氧还原能力都很差,皮肤修复能力也越差[4]。
正常的GSH在UVB照射后会消耗,后逐渐恢复,时间24h之后仍未达到初始值,而使用Alistin可以使皮肤内的GSH/GSSG比值在8h时恢复到正常值。
2. 对UVA的防护作用
UVA对皮肤的伤害比UVB要弱,损伤效应体现的时间略长。UVA对皮肤的伤害主要在真皮层,短期引起细胞的急性损伤,长期使细胞活性下降,关键性的蛋白如胶原蛋白、弹性蛋白结构改变,使得皮肤出现皱纹等问题。
实验模型
UVA(12J/cm2)辐照全皮肤模型(含表皮、真皮及皮下组织),皮肤表面涂抹SPF值为10/50防晒霜,或者涂抹Alistin水溶液。考察24h皮肤内的I型胶原蛋白(COL1A1)、装饰蛋白(DCN),纤维蛋白(FBN1)和弹力蛋白(ELN)及基质金属蛋白酶(MMP1)、炎症因子IL-1α基因的表达。[5,6]
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UVA照射24h内,皮肤内DCN、ELN、FBN1基因都都下调,MMP1上调。24h的结果对应UVA对皮肤真皮的早期急性伤害,可以看出产品的防护效果。
SPF10/50防晒产品对皮肤的防护效果
可以看出,SPF 10与SPF 50的防晒产品,对皮肤内的COL1A1、DCN、ELN等关键蛋白的基因降低效果基本差不多。
Alistin水溶液对皮肤的防护效果(裸露皮肤)
Alistin的即时防护效果与防晒霜类似,甚至优于防晒霜,决定皮肤弹性的弹性蛋白基因ELN防护效果要远远优于防晒霜。
综合上文Alistin对紫外的防护与修护效果,可以认为,Alistin与防晒霜作用机制完全不同,防晒霜用于皮肤表层的光线遮挡,防晒存在某些方面的局限性,如防护效果随涂抹时间下降、受涂抹均匀性影响较大等,不能达到100%的遮挡防护效果。
Alistin通过清除自由基,稳定细胞膜等生物学作用达到光防护作用,可以补充遮光剂不足,尤其在皮肤缺乏遮光剂的保护时,对皮肤起到基础的抗光老化作用。
Alistin光老化皮肤修复临床实验
与专业皮肤评价机构进行合作,选择21名年龄介于33岁与52岁之间,皮肤呈现光老化痕迹的女性志愿者,使用1%的Alistin乳液或者安慰剂,一天2次,持续使用28天,通过PRIMOS软件进行评估使用效果。
其中67%的志愿者显示出显著的光老化改善效果,皮肤变得光滑,有光泽。志愿者皮肤光滑度平均提升20%。鼻唇沟、前额、鱼尾纹都有较好的改善,皱纹深度变浅、甚至消失。
结论
皮肤光老化日益成为消费者所关注的话题,抗光老化活性物成为了防晒霜之外的补充与必须,收到了市场的关注。
EXSYMOL研发的Alistin产品,无论是针对紫外线中的UVB对皮肤的急性伤害,如红斑、水肿的预防与修护,还是UVA对真皮层的不可逆损伤产生的皱纹、弹性丧失,都有非常的好效果,该产品适用于添加在日常护肤类产品,也推荐添加在针对光老化预防与修护类的产品中,如防晒、晒后修复及全天候抗光老化等。
参考文献
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张学军等.现代皮肤病学基础(上下册)[M].北京:人民卫生出版社,2001:734-736.
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赵辨.中国临床皮肤病学[M].南京:江苏科学技术出版社,2010:167.
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张慧明,王海涛等. 紫外线诱导皮肤过敏的损伤类型和机理[J]. 香料香精化妆品. 2010年2月,1:42-45
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Meloni M., Farina A, De Servi B. Molecular modificationsof dermal and epidermal biomarkers following UVA exposures on reconstructedfull thickness human skin. Photochem Photobiol Sci. 2010 Apr;9(4):439-47.
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Lochner K. et al. Expression of decorin and collagens Iand III in different layers of human skin in vivo: a laser capturemicrodissection study. Biogerontology. 2007 Jun;8(3):269-82.
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